在制備粒徑小于200 nm、多分散系數(PDI)≤0.25且具備良好穩定性的脂質體。為優化脂質體的制備工藝,系統考察了微流控技術中的若干關鍵參數,包括總流速(TFR)、流速比(FRR)、磷脂類型以及磷脂與膽固醇的比例。結果表明,在大多數處方中,當TFR在1~3 ml·min?1范圍內變化(除TFR為3 ml·min?1外),對脂質體粒徑影響較小;在相同FRR條件下,增加或降低TFR可獲得相近粒徑的脂質體,該趨勢與先前研究一致。此外,TFR對脂質體制劑的PDI具有顯著影響,隨著TFR升高,PDI值增大,這也與文獻報道一致。TFR的增加還會影響制劑的穩定性,當TFR提高至2 ml·min?1時,穩定性有所下降。FRR與脂質體粒徑呈負相關關系;將FRR從1∶2提高至1∶4,有助于減少脂質體聚集,制得粒徑更小的脂質體,與已有研究趨勢相符。同時,FRR與PDI值呈負相關,提高FRR可降低部分樣品的PDI值。FRR的增加亦有助于提升脂質體制劑的穩定性,1∶4處方較1∶2處方表現出更優的穩定性。
采用多種脂質制備脂質體;使用DMPC、DPPC、DSPC、DOPC研究不同碳鏈長度對脂質體直徑及穩定性的影響。DSPC和DOPC具有相同的烴鏈長度,但烴鏈飽和度不同;雙鍵(C=C)存在于DOPC鏈中。此外,脂質(DMPC Tm 23℃,DPPC Tm 42℃,DSPC Tm 55℃,DOPC Tm?17℃)的轉變溫度的變化是另一個特性,研究其對處方穩定性的影響。提高磷脂酰基長度和轉變溫度(DSPC>DPPC>DMPC),脂質體直徑增大。
PDI平均值與脂質體大小(DSPC>DPPC>DMPC)變化趨勢相同;不同脂質處方PDI平均值均為DMPC(0.22),DPPC(0.23),DOPC(0.27),DSPC(0.40)。脂質類型也影響處方的穩定性;DPPC和DMPC處方比DSPC和DOPC處方更穩定。磷脂與膽固醇聯用可以提高脂質體的穩定性,改變脂質體的剛性;膽固醇是一種剛性類固醇,具有調節脂質鏈排列和減少囊泡結構不穩定性的能力。兩種磷脂與膽固醇的比例(2∶1和3∶1)可以為脂質體提供了期望的直徑和穩定性;磷脂與膽固醇比例為2∶1時,脂質體尺寸更小,更均勻,PDI更低。采用相同的制備參數,分別用DMPC,DPPC,DSPC和DOPC制備脂質體并用DLS進行表征,以篩選脂質。
乙醇被用作極性溶劑,它可擴散到水相并觸發脂質體的自組裝。先前的研究表明,由于乙醇的收縮效應(shrinkage effect),乙醇對降低脂質體直徑有顯著影響。此外,其他研究表明,乙醇能夠改變體系的凈電荷,并為其提供一定的空間穩定性,從而導致平均顆粒直徑的減小。